產(chǎn)品中心
PRODUCT CENTER
游離細胞DNA純化試劑盒
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貨號 |
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
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AC101 |
BcMag? 游離細胞DNA純化試劑盒 |
50preps |
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AC102 |
BcMag? 游離細胞DNA純化試劑盒 |
100preps |
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組件 |
存儲條件 |
目錄號：AC101 |
目錄號：AC102 |
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BcMag? HO-DNA Beads |
4°C |
1.0 ml |
2 ml |
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10x Lysis Buffer |
4°C |
5 ml |
10 ml |
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1x Elution Buffer |
4°C |
0.5ml |
1.0 ml |
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Proteinase K (20mg/ml) |
-20°C |
10 mg |
20 mg |
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Proteinase K Suspension Buffer |
4°C |
1.0 ml |
2.0 ml |
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SDS (20%) |
Room temperature |
2.5 ml |
5 ml |
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DTT (20%) |
-20°C |
2.5 ml |
5 ml |
運輸條件：在室溫環(huán)境下運輸
儲存條件：根據(jù)上表要求，在收到試劑盒后，儲存不同試劑。
簡介
游離細胞DNA (cfDNA)是指來自細胞凋亡或壞死后，在血液或者其他體液中存在的，游離于細胞外的雙鏈DNA片段，包括循環(huán)腫瘤DNA（ctDNA）、游離線粒體DNA（ccf-mtDNA）和游離胎兒細胞DNA（cffDNA）。這種DNA從各種細胞來源釋放到血液中，例如癌細胞，死細胞和胎兒細胞。cfDNA的提取對于各種應用非常重要，例如無創(chuàng)產(chǎn)前檢測，癌癥診斷和疾病監(jiān)測。目前，存在多種游離細胞DNA純化方法，和基于這些方法和方案變化的許多試劑盒。這些不同的程序和改變導致了一系列不同的游離細胞DNA純化方式，方法不同可能會影響游離細胞DNA的產(chǎn)量和純度。由于無細胞樣品中存在微量的循環(huán)核酸，以及其他污染物（如蛋白質、脂質和RNA）的存在，從血漿、血清和尿液中大規(guī)模分離循環(huán)核酸回收cfDNA具有很大難度。游離細胞DNA純化試劑盒提供了一種從其他污染物中純化cfDNA的可靠而有效的方法。
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cfDNA的提取對于生命科學，醫(yī)療保健和法醫(yī)學的許多應用至關重要。在產(chǎn)前檢測中，從母親血液中提取的cfDNA可用于確定胎兒的基因組成，這有助于檢測任何遺傳疾病或染色體異常。在癌癥診斷中，血液中cfDNA的存在可用于監(jiān)測疾病的進展，并評估治療的有效性。在法醫(yī)學中，cfDNA的提取用于從犯罪現(xiàn)場發(fā)現(xiàn)的血液樣本中識別個體。
BcMag ? 游離細胞DNA純化試劑盒旨在高效、有序地從人血漿中提取cfDNA。該試劑盒使用我們獨特的專有磁珠和優(yōu)化的緩沖液體系。本試劑盒可以使用游離細胞DNA BCT收集管從100μL至10 ml（通常產(chǎn)生約25納克cfDNA）的人血漿中高效分離出循環(huán)游離細胞DNA（cfDNA）。該程序采用溫和的裂解條件，避免了嚴苛裂解條件對核酸的破壞，如堿性裂解和有毒化學物質裂解細胞；保證了DNA的完整性和避免了殘留在樣品中有機溶劑耗時的清除過程。純化的cfDNA具有極高的完整性，可用于各種下游應用，如qPCR，ddPCR，NGS分析等。當與自動化操作設備結合使用時，可以同時分離多個樣品。或者，可以使用磁力架手動處理樣品。
與傳統(tǒng)的分離cfDNA的方法相比，磁珠法具有幾個優(yōu)點。磁珠比玻璃纖維過濾器可以更有效地結合DNA，從而產(chǎn)生更高、更一致的產(chǎn)量。此外，由于沒有使用過濾器或真空歧管，因此在提取過程中不會產(chǎn)生堵塞細胞顆粒的情況。這種堵塞問題在富含蛋白質的大體積樣品（如血漿）中尤其常見，而這些樣品通常被用于cfDNA研究。
cfDNA純化試劑盒的工作流程
游離細胞DNA純化試劑盒使用磁珠和特異性結合劑的組合從其他污染物中純化cfDNA。該試劑盒的工作原理是將cfDNA與磁珠結合，并將其與蛋白質，脂質和RNA等其他污染物分離。然后，純化的cfDNA可用于下游應用，例如PCR，測序和基因分型。
1. 向樣品中加入裂解緩沖液和蛋白酶K以裂解樣本并在65°C下孵育。
2. 添加功能性磁珠，并將磁珠和樣品溶液，通過渦旋/吹吸方式混勻，結合DNA。
3. 清洗磁珠。
4. 使用磁力架將磁珠與樣本溶液分離。
5. 從磁珠上洗脫DNA。
特點和優(yōu)勢
? 可靠有效的純化：游離細胞DNA純化試劑盒提供了一種可靠有效的純化cfDNA的方法，這對于下游應用的準確結果非常重要。
? 高產(chǎn)率：該試劑盒可提供高產(chǎn)量的cfDNA提取方式，這對于需要大量DNA的應用（例如測序和基因分型）至關重要。
? 可根據(jù)需要擴大或者縮小實驗提取體積。
? 易于使用：該試劑盒易于使用，可以在實驗室環(huán)境中進行，不需要高深的技術專業(yè)知識。
? 多功能：該試劑盒可用于各種體液，包括血液，血漿和其他體液，適用于各種應用。
? 靈活的設計，可以手動或全自動設備分離cfDNA
? 全自動化操作，無需苯酚萃取
? 提取體積范圍為100μL到10ml的血漿
? 洗脫溶液體積范圍為15μL到50ml
