產品中心
PRODUCT CENTER
一步法植物DNA純化試劑盒
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AQ101 |
BcMag ? 一步法植物DNA純化試劑盒 |
50 preps |
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AQ102 |
BcMag ? 一步法植物DNA純化試劑盒 |
100 preps |
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組件 |
存儲條件 |
50 preps，目錄號#AQ101 |
100 preps，目錄號#AQ102 |
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BcMag? U-DNA Beads |
4°C |
2.5 ml |
5.0 ml |
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10x Lysis Buffer (100mM Tris-HCl, PH 9.0) |
4°C |
0.6 ml |
1.2 ml |
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Proteinase K |
-20°C |
12.5 mg |
25 mg |
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DTT(1M) |
-20°C |
15.4 mg |
30.8 mg |
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Proteinase K Suspension Buffer |
4°C |
1.0 ml |
2.0 ml |
運輸和儲存：根據上表，在收到貨物時儲存各組分。
一步法植物DNA純化試劑盒可以從各種植物樣品來源中，快速，無需離心柱提取出基因組DNA。本試劑盒使用獨特的專有磁珠和緩沖液，它可以有效地裂解細胞并去除雜質，使DNA保持完整。通過同時處理>96個樣品，在不到30分鐘的時間內提高核酸產量并最大程度地減少DNA損失。
簡介
植物基因組突變分析是植物遺傳學研究和經濟作物改良研究中重要的一個研究方向。在其研究過程中，植物學家需要用到許多基因學研究工具來解決各種問題，如植物的抗病性、轉基因種子的產生、作物產量提高、群體遺傳學和植物生理學。在進行可重復的DNA分析研究中，如實時定量PCR、基因測序分型（GBS）或新一代測序（NGS），需要從植物的葉片、種子、根或其他植物材料中提取出高質量的DNA。
目前使用的提取植物DNA的標準程序，可能非常費時和需要大量的人力參與。而且，在植物基因分型等特定實驗中，更需要應用對長鏈DNA提取的有效方法。例如，傳統的植物DNA提取方式，需要用蛋白酶K消化4小時甚至過夜，然后再用苯酚：氯仿提取和乙醇沉淀，非常費時費力。其他提取技術，如二氧化硅膜結合和洗脫試劑盒，近些年也已廣泛應用在此提取領域。這些提取技術都是基于正色譜法的純化技術。該技術利用高濃度的解離鹽，如鹽酸胍，將DNA與二氧化硅膜結合。然后再用含有鹽/乙醇溶液的洗滌試劑清洗核酸結合后的硅膠柱或磁珠，以除去樣品中含有的雜質類生物分子。最后，再使用Tris洗脫緩沖液或超純水洗脫下結合在純化柱或磁珠上的純凈DNA。這種結合-清洗-洗脫的核酸提取過程非常耗時，需要多次清洗和移液步驟。在重復的移液過程中，就會導致大量的DNA損失（20-40%）和斷裂。此外，高濃度的解離鹽和其他雜質，很容易殘留到洗脫的DNA或RNA溶液中，影響核酸產物的最終純度和定量，以及下游反應的酶活性，如PCR反應。
BcMag? One-Step Plant DNA Purification Kit可以快速、無需純化柱等耗材，從各種植物樣品中提取出基因組DNA，包括葉、莖、芽、花、水果、種子等。該試劑盒使用我們獨特的專利磁珠和緩沖液，可以有效地裂解細胞，然后磁珠會有效的去除掉緩沖液中的所有雜質，使DNA保留在上清液中。該提取過程采用溫和的裂解方式，避免了在苛刻的裂解條件下，如堿性裂解和使用有毒化學品用于裂解細胞對核酸的損害，這樣就保持了DNA完整性和去除了從樣品中清除有機溶劑的耗時過程。此外，本產品中的磁珠在不用于提取DNA的情況下，也可在單個步驟中用于從樣品中清除PCR抑制劑（圖1）。使用本試劑盒提取核酸增加了DNA的完整性，提高了核酸產量，并將傳統的DNA純化技術中耗時的“結合-洗滌-洗脫”過程造成的DNA損失降至最低。在將樣本完全裂解后，它能夠在不到30分鐘的時間內完成超過96個樣品的DNA純化。純化出的基因組DNA具有高度的完整性，可用于各種下游應用，如qPCR等。
圖1. PCR 抑制劑的清除
工作流程（圖2）
圖2：一步法植物DNA純化試劑盒工作流程
1.使用鋼珠將樣品打碎。
2.離心并將樣品粉碎的顆粒轉移到新試管中。
3.將樣品與磁珠和蛋白酶K混合并加熱以裂解細胞。
4.旋渦使磁珠與PCR抑制劑充分結合。
5.用磁力架清除磁珠。
6將含有純凈DNA的上清液轉移。
應用
純化的DNA可用于下游應用，例如PCR，qPCR，單核苷酸多態性（SNP），基因分型，測序基因分型（GBS），新一代測序（NGS）等。
特點和優勢：
l 快速高效的純化方案：無需液體轉移，只需一個試管，無需事先分離DNA，可直接用于放大實驗的工作流程。
l 節約時間成本：可在不到一小時內處理96個樣本。
l 最高的核酸回收率：提取過程中的DNA損失最小。
l 有效去除抑制劑：多酚化合物、腐殖酸/黃腐酸、酸性多糖、鞣質、黑色素、肝素、洗滌劑、牛仔布染料、二價陽離子，如Ca2+、Mg2+等（見圖片2“PCR抑制劑去除”）。
l 性價比高：無需離心柱、過濾器、不用反復的重復移液和使用有機試劑。
l 可用于高通量實驗：與許多不同的全自動核酸提取系統兼容。
